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聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)是分子生物學(xué)中基礎(chǔ)且廣泛應(yīng)用的技術(shù)之一,用于特異性擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段。盡管PCR儀和試劑是核心要素,但實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行同樣高度依賴一系列專用耗材。這些pcr耗材不僅影響反應(yīng)效率和特異性,還直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性...
一、鄰位連接適用的最短和最長距離是多少?所有的Duolink®PLA產(chǎn)品都是被設(shè)計(jì)用于鄰位檢測的。當(dāng)使用二抗方法時(shí),理論上在兩種靶標(biāo)蛋白(表位)間產(chǎn)生信號的最長距離為40nm。這些數(shù)據(jù)是基于抗體的平均直徑約為10nm而計(jì)算出來的。Duolink®PLA理論上可檢測距離在0nm之內(nèi)的兩個(gè)表位,只要兩種單抗可發(fā)生結(jié)合并且不存在位阻。二、Duolink®PLA產(chǎn)品或試劑可持續(xù)多久?1.檢測試劑盒中的所有試劑必須總是被保存在-20°C。這一點(diǎn)對于連接酶和聚合酶...
建議及技巧:用于蛋白檢測的Duolink®PLA技術(shù)可提供一種具有一系列明確定義步驟的簡易而直接的實(shí)驗(yàn)方法。該章節(jié)將會對可確保Duolink®PLA實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的一些重要注意事項(xiàng)進(jìn)行描述。一、前期考慮:1.采用在待測樣品內(nèi)可具有最佳一抗性能的條件。這些條件包括樣品處理參數(shù)(固定、通透化、抗原修復(fù)等)、一抗效價(jià)以及孵育時(shí)間。2.為了可對結(jié)果進(jìn)行正確的評估,在實(shí)驗(yàn)中總是需要設(shè)置技術(shù)及可用的生物學(xué)對照。3.Duolink®PLAControlKit是一款可對...
Duolink®PLA結(jié)果為蛋白質(zhì)事件(表達(dá)、相互作用或修飾)提供了相對定量。因此,加入技術(shù)對照組,以及在可能的情況下加入生物對照組,是十分重要的。技術(shù)對照:每個(gè)Duolink®PLA實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該包含兩個(gè)技術(shù)對照組。這包括:1.分別省略一種一抗用于檢測每種一抗的非特異性結(jié)合有助于確定最佳一抗效價(jià)2.省略所有一抗用于檢測系統(tǒng)中Duolink®PLA探針的非特異性結(jié)合生物對照:除了技術(shù)對照外,強(qiáng)烈建議使用生物對照。陽性和陰性生物對照均可提供有價(jià)值的信息。1....
一、樣品選擇對樣品和蛋白質(zhì)靶標(biāo)的已有了解十分重要。選擇具有已知靶蛋白表達(dá)的系統(tǒng)將顯著增加Duolink®PLA實(shí)驗(yàn)成功的幾率。Duolink®PLA實(shí)驗(yàn)所需的樣本與用于傳統(tǒng)免疫熒光(IF)、免疫組織化學(xué)(IHC)或流式細(xì)胞術(shù)的樣本相同。因此,Duolink®PLA試劑適用多種樣品類型,包括:1.貼壁細(xì)胞2.懸浮細(xì)胞3.血細(xì)胞4.細(xì)胞離心涂片制劑5.石蠟包埋細(xì)胞樣品6.石蠟包埋組織切片7.冰凍組織切片8.新鮮組織切片在進(jìn)行Duolink®PLA實(shí)...
要成功地執(zhí)行Duolink®PLA實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)方案中有一些必要的考慮因素需要正確地準(zhǔn)備、設(shè)置和執(zhí)行。Duolink®PLA產(chǎn)品可用于熒光和明場。熒光Duolink®PLA試劑可用于顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用。一、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要設(shè)計(jì)一個(gè)成功的Duolink®PLA實(shí)驗(yàn),必須考慮很多因素。這些因素包括但不限于:1.確定蛋白質(zhì)靶標(biāo)和實(shí)驗(yàn)類型2.選擇樣品(細(xì)胞或組織)3.設(shè)計(jì)您的讀出方案4.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對照(技術(shù)和生物)靶標(biāo)識別:首先要確定的是目標(biāo)蛋白靶標(biāo)。是單一蛋...
ExSil®100-高伸長率二組分彈性體模壓級GelestExSil®是一種雙組分高伸長率有機(jī)硅彈性體,專為成型應(yīng)用而開發(fā)。特點(diǎn)包括自修復(fù)、高恢復(fù)、高伸長率、低萃取物、高撕裂強(qiáng)度、高壓縮形變、高透氧性和長期熱穩(wěn)定性。該材料具有流動性和可模塑性,有兩個(gè)等級可供選擇。屬性:硬度低安全:氮?dú)庀掳b部分100:1套件:202g套件–包含200gA部分(堿)、2gB部分(交聯(lián)劑)1.01kg套件–包含1000gA部分(基礎(chǔ))、10gB部分(交聯(lián)劑)Gelest®...
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